நுண்ணங்கிகளை வளர்த்தல் — ஊடகங்கள் மற்றும் தூய்மை முறை (Culturing Microorganisms)
ஏன் இது முக்கியம்? ஒரு ஆய்வுகூட பாத்திரத்தை சரியாக கிருமியழிக்காவிட்டால், நீங்கள் வளர்க்கும் "நோய்க்காரணி" உண்மையில் மாசு இருக்கலாம் — நூறு ஆண்டு மருத்துவ வரலாற்றில் இந்த தவறு பல மரணங்களுக்கு வழிவகுத்தது.
MacConkey agar சுய பிரிவு செய்கிறது; Blood agar காட்சிப்படுத்துகிறது — சரியான ஊடகத் தேர்வு = சரியான உயிரி = சரியான சிகிச்சை.
⎷ கற்றல் விளைவு / NIE Learning Outcome
- கிருமியழித்தல் (sterilization) என்பதை வரையறுத்து, பௌதிக மற்றும் இரசாயன முறைகளை வேறுபடுத்துதல்.
- வளர்ப்படகம் (culture medium) தயாரிப்பின் நிபந்தனைகளையும் போசணை ஏகார் (NA), உருளைக்கிழங்கு டெக்ஸ்ட்ரோசு ஏகார் (PDA) ஆகியவற்றையும் விபரித்தல்.
- ஏகாரின் (agar) பங்கையும், மாசடைதலைத் தவிர்க்கும் தூய்மை முறையையும் (aseptic technique) விளக்குதல்.
நுண்ணங்கிகளை (microorganisms) அவற்றின் இயற்கை வாழிடமான மண், நீர், காற்று ஆகியவற்றில் வைத்து ஆராய்வது கடினம். எனவே அவற்றை ஆய்வுகூடத்திற்குக் கொண்டுவந்து, அவற்றின் வளர்ச்சிக்கும் இனப்பெருக்கத்திற்கும் ஏற்ற நிபந்தனைகளை வழங்க வேண்டும். இவ்வாறு செயற்கையான ஊடகங்களில் (artificial media) நுண்ணங்கிகளை வளர்ப்பதே வளர்ப்பு (culturing) எனப்படும். இதற்கு இரு அடிப்படை ஆய்வுகூடத் தொழில்நுட்பங்கள் தேவைப்படுகின்றன — கிருமியழித்தல் (sterilization) மற்றும் வளர்ப்படகம் தயாரித்தல்.
1. கிருமியழித்தல் (Sterilization)
Autoclave (sterilization device)
Wikipedia → · CC
உள்வித்துக்களையும் (endospores) உள்ளடக்கி, எல்லா வகையான நுண்ணங்கி வடிவங்களையும் அகற்றுதல் அல்லது அழித்தல் கிருமியழித்தல் (sterilization) எனப்படும். இது மாசடைதல் (contamination) இன்றி விரும்பிய நுண்ணங்கியை வளர்ப்பதற்கு இன்றியமையாதது. கிருமியழித்தல் பௌதிக (physical) மற்றும் இரசாயன (chemical) என இருவகைப்படும்.
NIE குறிப்பு: கிருமியழித்தல் என்பது எல்லா உயிர் வடிவங்களையும் (உள்வித்துக்கள் உட்பட) அழிக்கிறது; ஆனால் நோய்க்கிருமியழித்தல் (disinfection) என்பது நோய்விளைவிக்கும் அங்கிகளை மட்டும் பேண்தகு மட்டத்திற்குக் குறைக்கிறது.
(அ) பௌதிகமுறைக் கிருமியழித்தல் (Physical methods)
- ஈரவெப்பமுறை (moist heat): உயர் வெப்பநிலையும் அமுக்கமும் புரதங்களைச் சிதைப்பதன் மூலம் நுண்ணங்கிகளை அழிக்கின்றன. உதாரணம் — அமுக்க அடுப்பு (autoclave): 1 atm (15 psi) அமுக்கத்தில் 121 °C நீராவியை 15 நிமிடங்கள் செயற்படுத்தினால், உள்வித்துக்கள் உட்பட எல்லா நுண்ணங்கிகளும் (பிறயோன்களைத் தவிர) கொல்லப்படும். வளர்ப்படகம், கரைசல்கள், கண்ணாடிப் பாத்திரங்கள், மருத்துவ உபகரணங்கள் ஆகியவற்றை இவ்வாறு கிருமியழிக்கலாம். அமுக்க அடுப்புக்குப் பதிலாக அமுக்க அடுப்பானையும் (pressure cooker) பயன்படுத்தலாம்.
- உலர்வெப்பமுறை (dry heat): கண்ணாடிப் பாத்திரங்கள், பெற்றிக் கிண்ணங்கள் (Petri dishes), ஊசிகள், வளையங்கள் முதலியவற்றைக் கிருமியழிக்கப் பயன்படும்.
- நேரடிச் சுடரிடல் (direct flaming): கிருமி புகுத்தும் வளையம் (inoculation loop), ஊசி, கத்தி ஆகியவற்றை பன்சன் சுடரில் சிவந்து போகும்வரை சூடாக்குதல்.
- எரித்தல் (incineration): மருத்துவமனைக் கழிவுகளைக் கிருமியழிக்க உயர் வெப்பநிலை அடுப்பில் சாம்பலாக்குதல்.
- உலர்வளி கிருமியழித்தல் (hot-air): கண்ணாடிப் பாத்திரங்களை உலர்வளி அடுப்பில் ≈170 °C இல் 2 மணித்தியாலங்கள் சூடாக்கி ஒட்சியேற்றத்தால் (oxidation) நுண்ணங்கிகளைக் கொல்லல்.
- பாய்ச்சராக்கம் (pasteurization): லூயி பாஸ்தர் கண்டறிந்த மென்வெப்ப முறை; சுவை, அமைப்பு, போசணைப் பெறுமதியை பெருமளவு பாதிக்காமல் கெடுக்கும் நுண்ணங்கிகளைக் கொல்லும். உயர்வெப்ப-குறுநேர முறை (HTST) — குறைந்தது 72 °C இல் 15 செக்கன்; தாழ்வெப்ப-நீள்நேர முறை (LTLT) — 63 °C இல் 30 நிமிடம். அதீத-உயர்வெப்ப (UHT) முறையில் பால் ≈140 °C இல் 5 செக்கனுக்கும் குறைவாகச் சூடாக்கப்படுகிறது.
- கொதிப்பித்தல் (boiling): அறுவை உபகரணங்கள் முதலியவற்றை 100 °C இல் கொதிக்கவைத்தல்; பெரும்பாலான நோய்க்கிருமிகள் இங்கு கொல்லப்படும்.
- வடிகட்டல் (filtration): நொதியங்கள், விற்றமின்கள், எதிர்உயிரியங்கள் (antibiotics), வக்சின்கள், சில வளர்ப்படகங்கள் போன்ற வெப்பத்திற்கு உணர்வான திரவங்களைக் கிருமியழிக்க மென்சவ்வு வடிதாள்கள் (membrane filters) பயன்படும். துளை அளவு 0.01 µm – 0.45 µm; கிருமிகள், வைரசுகள், சில பெரிய புரத மூலக்கூறுகளையும் தடுக்கின்றன.
- புறவூதா கதிர்வீசல் (UV radiation): நேரடிக் கதிரிடலில் படும் நுண்ணங்கிகளின் DNA ஐச் சிதைத்து அழிக்கிறது. ஆனால் கதிர்கள் காகிதம், கண்ணாடி, துணி போன்ற திண்மப் பரப்புகளை ஊடுருவாது; எனவே அறுவை அறைகள், நாற்று மேடைகள் போன்ற காற்றைக் கிருமியழிக்கப் பயன்படும்.
(ஆ) இரசாயனமுறைக் கிருமியழித்தல் (Chemical methods)
எத்திலீன் ஒட்சைட்டு (ethylene oxide), குளோரின் இருஒட்சைட்டு (chlorine dioxide) ஆகிய வாயுக்கள் இரசாயனக் கிருமியழிக்கும் ஏதுக்களாகப் பயன்படுகின்றன. எத்திலீன் ஒட்சைட்டு உள்வித்துக்களையும் கொல்லும், மிக ஊடுருவும் தன்மையுடையது — எனவே மருத்துவமனை மெத்தைகளைக் கிருமியழிக்கப் பயன்படும். குளோரின் இருஒட்சைட்டு Bacillus anthracis உள்வித்துக்களால் மாசடைந்த கட்டிடப் பரப்புகளைப் புகையூட்டக் (fumigate) கிருமியழிக்கப் பயன்படுகிறது.
2. வளர்ப்படகம் தயாரித்தல் (Preparation of culture media)
Microbiological culture media
Wikipedia → · CC
நுண்ணங்கிகள் ஆய்வுகூட நிலையில் வளரவும் இனப்பெருகவும் தேவையான போசணையையும் (nutrition) பற்றுத்தளத்தையும் (anchorage) வழங்க தயாரிக்கப்படும் போசணைப் பதார்த்தம் வளர்ப்படகம் (culture medium) எனப்படும். எல்லா நுண்ணங்கிகளையும் ஆய்வுகூட ஊடகத்தில் வளர்க்க முடியாது; வளர்க்க முடியாதவை வளர்க்க முடியாத நுண்ணங்கிகள் (non-culturable microorganisms) எனப்படும். சில நுண்ணங்கிகள் எந்த ஊடகத்திலும் நன்கு வளரும், ஆனால் வேறு சில விசேடித்த ஊடகத்தை (special medium) வேண்டி நிற்கின்றன.
ஒரு நல்ல வளர்ப்படகம் அத்தியாவசிய போசணைப் பதார்த்தங்கள், போதுமான ஈரலிப்பு (moisture), பொருத்தமான pH ஆகியவற்றைக் கொண்டிருக்க வேண்டும். மேலும் இது ஆரம்பத்தில் கிருமியழிக்கப்பட்ட (sterile) நிலையில் — அதாவது எவ்வொரு உயிருள்ள நுண்ணங்கியையும் கொண்டிராமல் — இருக்க வேண்டும். எனவே வளர்ப்படகம் தயாரிக்கும்போது எல்லாக் கண்ணாடி உபகரணங்களும் திரவ போசணைக் கரைசல்களும் கிருமியழிக்கப்பட வேண்டும்.
பொதுவான இரு ஊடகங்கள்:
- போசணை ஏகார் (Nutrient Agar, NA): பற்றீரியா (bacteria) வளர்ப்புக்கு. பெப்டோன் (peptone), இறைச்சிச்சாறு (meat extract), சோடியம் குளோரைட்டு (NaCl), ஏகார் (agar), காய்ச்சி வடித்த நீர் ஆகியவற்றால் ஆனது.
- உருளைக்கிழங்கு டெக்ஸ்ட்ரோசு ஏகார் (Potato Dextrose Agar, PDA): பூஞ்சை (fungi) வளர்ப்புக்கு. உருளைக்கிழங்கு, குளுக்கோசு (glucose), ஏகார், காய்ச்சி வடித்த நீர் ஆகியவற்றால் ஆனது.
இங்கு ஏகார் (agar) ஒரு திண்மமாக்கும் கருவியாக (solidifying agent) பயன்படுகிறது. ஏகார் 40 °C இற்குக் கீழுள்ள வெப்பநிலையில் திண்மமாகிறது; எனவே ஏகாரைக் கொண்ட வளர்ப்படகம் ஒரு திண்ம ஊடகம் (solid medium) ஆகும். நுண்ணங்கிகளை வளர்க்கும்போது திண்ம வளர்ப்படகம் வழமையாகப் பெற்றிக் கிண்ணங்களிலோ (Petri dishes) சோதனைக் குழாய்களிலோ வைக்கப்படுகிறது.
NIE குறிப்பு: ஏகார் பெரும்பாலான பற்றீரியாவால் சிதைக்கப்படாது, மேலும் இது குளிர்ந்ததும் உறுதியாகத் திண்மமாகிறது — இவ்விரு பண்புகளே ஏகாரை சிறந்த திண்மமாக்கும் கருவியாக்குகின்றன.
3. ஊடக வகைகள் (Types of media)
E. coli colonies on agar plate
Wikipedia → · CC
| வகை / Type | பயன்பாடு / Use |
|---|---|
| பொது ஊடகம் (general medium) — NA, PDA | பல்வேறு நுண்ணங்கிகளை வளர்க்கும். |
| விசேடித்த / தேர்வு ஊடகம் (special / selective medium) | குறிப்பிட்ட நுண்ணங்கிகளை மட்டும் வளர அனுமதிக்கும். |
| திண்ம ஊடகம் (solid medium) — ஏகார் சேர்த்தது | பெற்றிக் கிண்ணம் / சோதனைக் குழாயில்; தனிக்கல வளர்ப்புக்கு. |
| திரவ ஊடகம் (broth) — போசணைக் குழம்பு | பற்றீரியா, மதுவம், பூஞ்சணம் பெருமளவில் வளரும். உணவுப் பொருட்களும் இயற்கையில் இவ்வாறு தொழிற்படுகின்றன. |
4. தூய்மை முறை (Aseptic technique)
Aseptic technique in the operating theatre
Wikipedia → · CC
வளர்ப்பின்போது வெளிப்புற நுண்ணங்கிகள் ஊடகத்துள் புகாமல் தடுக்க தூய்மை முறை (aseptic technique) கைக்கொள்ளப்படுகிறது. கிருமியழிக்கப்பட்ட கருவிகள் (வளையம், ஊசி), சுடரருகே வேலை செய்தல், கட்டுப்படுத்தப்பட்ட சூழல் ஆகியவை மாசடைதலைத் (contamination) தவிர்க்கின்றன. நுண்ணங்கிகள் நிறமற்றவையாகத் தோன்றுவதால், அவற்றை அவதானிக்க சாயமிடல் (staining) — மெத்திலீன் நீலம், படிக ஊதா (crystal violet), சப்ரனின் (safranin) போன்ற சாயங்களைப் பயன்படுத்தி நிறமேற்றல் — பயன்படுகிறது. சாயமிடுவதற்கு முன் நுண்ணங்கிகள் கண்ணாடித் தகட்டில் நிலைப்படுத்தப்பட (fixed) வேண்டும்.
▶ காணொளி வளம் / Video Reference
Bacteria (Updated)
Amoeba Sisters
📝 NIE பரீட்சை மாதிரி வினாக்கள் / Exam-pattern Questions
உபபாடம் முடிந்ததும் நடத்தப்படும் பரீட்சை பாணியில். (பல்தேர்வு + கட்டமைப்பு + கட்டுரை)
1. கிருமியழித்தல் (sterilization) என்பது? / Sterilization is?
- நோய்க்கிருமிகளை மட்டும் குறைத்தல் / Reduces only pathogens
- உள்வித்துக்கள் உட்பட எல்லா நுண்ணங்கி வடிவங்களையும் அழித்தல் / Destroys all microbial forms including endospores
- ஊடகத்தைச் சாயமிடல் / Staining the medium
- pH ஐ மாற்றுதல் / Changing the pH
- ஈரலிப்பை அதிகரித்தல் / Increasing moisture
பதில் / Answer
(2) உள்வித்துக்கள் உட்பட எல்லா நுண்ணங்கி வடிவங்களையும் அழித்தல் / Destroys all microbial forms including endospores — எல்லா உயிர் வடிவங்களையும் (உள்வித்து உட்பட) அழிப்பதே கிருமியழித்தல்.
2. அமுக்க அடுப்பின் (autoclave) நிபந்தனைகள்? / Autoclave conditions?
- 100 °C, 30 நிமிடம் / 100 °C, 30 min
- 121 °C, 1 atm (15 psi), 15 நிமிடம் / 121 °C, 1 atm (15 psi), 15 min
- 170 °C, 2 மணி / 170 °C, 2 h
- 63 °C, 30 நிமிடம் / 63 °C, 30 min
- 140 °C, 5 செக்கன் / 140 °C, 5 s
பதில் / Answer
(2) 121 °C, 1 atm (15 psi), 15 நிமிடம் / 121 °C, 1 atm (15 psi), 15 min — 121 °C நீராவி, 1 atm/15 psi, 15 நிமிடம்.
3. அமுக்க அடுப்பு எந்த நுண்ணங்கியை அழிக்க முடியாது? / Which does an autoclave NOT kill?
- உள்வித்துக்கள் / Endospores
- பற்றீரியா / Bacteria
- பிறயோன்கள் / Prions
- பூஞ்சை / Fungi
- வைரசுகள் / Viruses
பதில் / Answer
(3) பிறயோன்கள் / Prions — பிறயோன்களைத் தவிர அனைத்தையும் அழிக்கும்.
4. ஈரவெப்ப கிருமியழித்தல் நுண்ணங்கிகளை எவ்வாறு அழிக்கிறது? / How does moist heat kill microbes?
- DNA ஐ உடைத்து / By breaking DNA
- புரதங்களைச் சிதைத்து / By denaturing proteins
- ஒட்சியேற்றத்தால் / By oxidation
- வடிகட்டலால் / By filtration
- சாயமிடலால் / By staining
பதில் / Answer
(2) புரதங்களைச் சிதைத்து / By denaturing proteins — உயர் வெப்பம்+அமுக்கம் புரதங்களைச் சிதைக்கின்றன.
5. உலர்வெப்ப கிருமியழித்தலின் எளிய முறை? / Simplest dry-heat method?
- நேரடிச் சுடரிடல் / Direct flaming
- வடிகட்டல் / Filtration
- பாய்ச்சராக்கம் / Pasteurization
- அமுக்க அடுப்பு / Autoclaving
- UV கதிர்வீசல் / UV radiation
பதில் / Answer
(1) நேரடிச் சுடரிடல் / Direct flaming — வளையம்/ஊசியைச் சுடரில் சிவக்க வைத்தல்.
6. உலர்வளி (hot-air) கிருமியழித்தலின் நிபந்தனை? / Hot-air sterilization condition?
- 121 °C, 15 நிமிடம் / 121 °C, 15 min
- ≈170 °C, 2 மணி / ≈170 °C, 2 h
- 72 °C, 15 செக்கன் / 72 °C, 15 s
- 100 °C கொதிப்பு / 100 °C boiling
- 37 °C, 24 மணி / 37 °C, 24 h
பதில் / Answer
(2) ≈170 °C, 2 மணி / ≈170 °C, 2 h — ≈170 °C இல் 2 மணித்தியாலம்; ஒட்சியேற்றத்தால் கொல்லும்.
7. HTST பாய்ச்சராக்கத்தின் நிபந்தனை? / HTST pasteurization condition?
- 63 °C, 30 நிமிடம் / 63 °C, 30 min
- குறைந்தது 72 °C, 15 செக்கன் / at least 72 °C, 15 s
- 140 °C, 5 செக்கன் / 140 °C, 5 s
- 121 °C, 15 நிமிடம் / 121 °C, 15 min
- 100 °C, 10 நிமிடம் / 100 °C, 10 min
பதில் / Answer
(2) குறைந்தது 72 °C, 15 செக்கன் / at least 72 °C, 15 s — HTST — குறைந்தது 72 °C, 15 செக்கன்.
8. பாய்ச்சராக்கத்தைக் கண்டறிந்தவர்? / Who developed pasteurization?
- ரொபேட் கோச் / Robert Koch
- லூயி பாஸ்தர் / Louis Pasteur
- அலெக்சாண்டர் பிளமிங் / Alexander Fleming
- லீவன்ஹூக் / Leeuwenhoek
- எட்வேட் ஜென்னர் / Edward Jenner
பதில் / Answer
(2) லூயி பாஸ்தர் / Louis Pasteur — லூயி பாஸ்தர் (Louis Pasteur).
9. வெப்பத்திற்கு உணர்வான திரவங்களை எந்த முறையால் கிருமியழிப்பர்? / Heat-sensitive liquids are sterilised by?
- அமுக்க அடுப்பு / Autoclaving
- மென்சவ்வு வடிகட்டல் / Membrane filtration
- கொதிப்பித்தல் / Boiling
- நேரடிச் சுடரிடல் / Direct flaming
- எரித்தல் / Incineration
பதில் / Answer
(2) மென்சவ்வு வடிகட்டல் / Membrane filtration — நொதியம்/வக்சின் போன்றவற்றை மென்சவ்வு வடிதாளால்.
10. மென்சவ்வு வடிதாளின் துளை அளவு வீச்சு? / Pore size range of membrane filters?
- 1–5 mm
- 0.01–0.45 µm
- 10–50 µm
- 100–200 nm மட்டும் / 100–200 nm only
- 1–2 cm
பதில் / Answer
(2) 0.01–0.45 µm — 0.01–0.45 µm; கிருமி, வைரசு, பெரிய புரதங்களைத் தடுக்கும்.
11. UV கதிர்வீசலின் முக்கிய குறைபாடு? / Major disadvantage of UV radiation?
- மிக விலையுயர்வு / Too expensive
- திண்மப் பரப்புகளை ஊடுருவாது / Cannot penetrate solid surfaces
- ஊடகத்தைச் சிதைக்கும் / Destroys the medium
- உள்வித்துக்களை உருவாக்கும் / Creates endospores
- pH ஐ உயர்த்தும் / Raises pH
பதில் / Answer
(2) திண்மப் பரப்புகளை ஊடுருவாது / Cannot penetrate solid surfaces — காகிதம்/கண்ணாடி/துணியை ஊடுருவாது; நேரடித் தொடுகை தேவை.
12. UV கதிர்வீசல் நுண்ணங்கியை அழிக்கும் வழி? / UV radiation kills microbes by?
- DNA ஐச் சிதைத்து / By damaging DNA
- புரதம் சேர்த்து / By adding protein
- ஏகாரை உருக்கி / By melting agar
- pH உயர்த்தி / By raising pH
- ஈரலிப்பு சேர்த்து / By adding moisture
பதில் / Answer
(1) DNA ஐச் சிதைத்து / By damaging DNA — நேரடிக் கதிரிடலில் படும் கலங்களின் DNA ஐச் சிதைக்கிறது.
13. இரசாயனக் கிருமியழிக்கும் ஏதுக்கள்? / Chemical sterilizing agents?
- ஏகார், பெப்டோன் / Agar, peptone
- எத்திலீன் ஒட்சைட்டு, குளோரின் இருஒட்சைட்டு / Ethylene oxide, chlorine dioxide
- குளுக்கோசு, NaCl / Glucose, NaCl
- நீர், எத்தனோல் மட்டும் / Water, ethanol only
- மெத்திலீன் நீலம் / Methylene blue
பதில் / Answer
(2) எத்திலீன் ஒட்சைட்டு, குளோரின் இருஒட்சைட்டு / Ethylene oxide, chlorine dioxide — எத்திலீன் ஒட்சைட்டு, குளோரின் இருஒட்சைட்டு (வாயுக்கள்).
14. மருத்துவமனை மெத்தைகளைக் கிருமியழிக்கப் பயன்படும் வாயு? / Gas used to sterilise hospital mattresses?
- குளோரின் இருஒட்சைட்டு / Chlorine dioxide
- எத்திலீன் ஒட்சைட்டு / Ethylene oxide
- ஒட்சிசன் / Oxygen
- கரியமில வாயு / CO₂
- நைதரசன் / Nitrogen
பதில் / Answer
(2) எத்திலீன் ஒட்சைட்டு / Ethylene oxide — எத்திலீன் ஒட்சைட்டு — மிக ஊடுருவும், உள்வித்தும் கொல்லும்.
15. Bacillus anthracis உள்வித்துக்களைப் புகையூட்டக் கிருமியழிக்கப் பயன்படுவது? / Used to fumigate Bacillus anthracis endospores?
- எத்திலீன் ஒட்சைட்டு / Ethylene oxide
- குளோரின் இருஒட்சைட்டு / Chlorine dioxide
- UV கதிர் / UV light
- அமுக்க அடுப்பு / Autoclave
- மென்சவ்வு வடிதாள் / Membrane filter
பதில் / Answer
(2) குளோரின் இருஒட்சைட்டு / Chlorine dioxide — குளோரின் இருஒட்சைட்டு.
16. வளர்ப்படகம் (culture medium) என்பது? / A culture medium is?
- நுண்ணங்கியை அழிக்கும் இரசாயனம் / A chemical that kills microbes
- போசணையும் பற்றுத்தளமும் வழங்கும் போசணைப் பதார்த்தம் / Nutrient material giving nutrition and anchorage
- ஒரு வகை நுண்ணங்கி / A type of microbe
- ஒரு சாயம் / A dye
- ஒரு வடிதாள் / A filter
பதில் / Answer
(2) போசணையும் பற்றுத்தளமும் வழங்கும் போசணைப் பதார்த்தம் / Nutrient material giving nutrition and anchorage — ஆய்வுகூட வளர்ச்சிக்கு போசணை+பற்றுத்தளம் வழங்கும் பதார்த்தம்.
17. ஆய்வுகூட ஊடகத்தில் வளரமுடியாத நுண்ணங்கிகள்? / Microbes that cannot grow on lab media?
- தேர்வு நுண்ணங்கிகள் / Selective microbes
- வளர்க்க முடியாத நுண்ணங்கிகள் / Non-culturable microorganisms
- திண்ம நுண்ணங்கிகள் / Solid microbes
- போசணை நுண்ணங்கிகள் / Nutrient microbes
- -
பதில் / Answer
(2) வளர்க்க முடியாத நுண்ணங்கிகள் / Non-culturable microorganisms — வளர்க்க முடியாத (non-culturable) நுண்ணங்கிகள்.
18. ஒரு வளர்ப்படகம் கட்டாயம் கொண்டிருக்க வேண்டியவை? / A medium must contain?
- நோய்க்கிருமிகள் / Pathogens
- அத்தியாவசிய போசணை, ஈரலிப்பு, பொருத்தமான pH / Nutrients, moisture, suitable pH
- UV கதிர் / UV light
- எத்திலீன் ஒட்சைட்டு / Ethylene oxide
- உள்வித்துக்கள் / Endospores
பதில் / Answer
(2) அத்தியாவசிய போசணை, ஈரலிப்பு, பொருத்தமான pH / Nutrients, moisture, suitable pH — அத்தியாவசிய போசணை + போதுமான ஈரலிப்பு + பொருத்தமான pH.
19. வளர்ப்படகம் ஆரம்பத்தில் எப்படி இருக்க வேண்டும்? / A medium must initially be?
- நோய்க்கிருமி நிறைந்ததாக / Full of pathogens
- கிருமியழிக்கப்பட்ட (sterile) நிலையில் / Sterile
- அமிலத்தன்மை மிக்கதாக / Strongly acidic
- உலர்ந்ததாக / Completely dry
- நிறமுடையதாக / Coloured
பதில் / Answer
(2) கிருமியழிக்கப்பட்ட (sterile) நிலையில் / Sterile — எவ்வொரு உயிருள்ள நுண்ணங்கியும் இல்லாத கிருமியழிக்கப்பட்ட நிலை.
20. போசணை ஏகார் (NA) பொதுவாக எதை வளர்க்கப் பயன்படும்? / Nutrient Agar (NA) is generally used to grow?
- பூஞ்சை / Fungi
- பற்றீரியா / Bacteria
- வைரசு / Viruses
- பிறயோன் / Prions
- தாவரம் / Plants
பதில் / Answer
(2) பற்றீரியா / Bacteria — NA — பற்றீரியா வளர்ப்புக்கு.
21. PDA பொதுவாக எதை வளர்க்கப் பயன்படும்? / PDA is generally used to grow?
- பற்றீரியா / Bacteria
- பூஞ்சை / Fungi
- வைரசு / Viruses
- ஆல்ஃகா மட்டும் / Algae only
- -
பதில் / Answer
(2) பூஞ்சை / Fungi — PDA — பூஞ்சை (fungi) வளர்ப்புக்கு.
22. போசணை ஏகாரின் (NA) கூறுகள்? / Composition of Nutrient Agar (NA)?
- உருளைக்கிழங்கு, குளுக்கோசு, ஏகார் / Potato, glucose, agar
- பெப்டோன், இறைச்சிச்சாறு, NaCl, ஏகார், வடித்த நீர் / Peptone, meat extract, NaCl, agar, distilled water
- எத்திலீன் ஒட்சைட்டு + நீர் / Ethylene oxide + water
- மெத்திலீன் நீலம் + ஏகார் / Methylene blue + agar
- -
பதில் / Answer
(2) பெப்டோன், இறைச்சிச்சாறு, NaCl, ஏகார், வடித்த நீர் / Peptone, meat extract, NaCl, agar, distilled water — பெப்டோன், இறைச்சிச்சாறு, NaCl, ஏகார், காய்ச்சி வடித்த நீர்.
23. PDA இன் கூறுகள்? / Composition of PDA?
- உருளைக்கிழங்கு, குளுக்கோசு, ஏகார், வடித்த நீர் / Potato, glucose, agar, distilled water
- பெப்டோன், NaCl, ஏகார் / Peptone, NaCl, agar
- இறைச்சிச்சாறு மட்டும் / Meat extract only
- குளோரின் இருஒட்சைட்டு / Chlorine dioxide
- -
பதில் / Answer
(1) உருளைக்கிழங்கு, குளுக்கோசு, ஏகார், வடித்த நீர் / Potato, glucose, agar, distilled water — உருளைக்கிழங்கு, குளுக்கோசு, ஏகார், காய்ச்சி வடித்த நீர்.
24. வளர்ப்படகத்தில் ஏகாரின் (agar) பங்கு? / Role of agar in a medium?
- போசணை மூலம் / Nutrient source
- திண்மமாக்கும் கருவி / Solidifying agent
- சாயம் / A dye
- கிருமியழிப்பான் / Sterilant
- pH காப்பான் / pH buffer
பதில் / Answer
(2) திண்மமாக்கும் கருவி / Solidifying agent — ஏகார் திண்மமாக்கும் கருவி (solidifying agent).
25. ஏகார் எந்த வெப்பநிலைக்குக் கீழ் திண்மமாகிறது? / Below what temperature does agar solidify?
- 100 °C
- 40 °C
- 0 °C
- 121 °C
- 72 °C
பதில் / Answer
(2) 40 °C — 40 °C இற்குக் கீழ் திண்மமாகிறது.
26. ஏகார் சிறந்த திண்மமாக்கும் கருவியாவதற்கான காரணம்? / Why is agar a good solidifying agent?
- விரைவாக ஒட்சியேற்றமடைகிறது / It oxidises fast
- பெரும்பாலான பற்றீரியாவால் சிதைக்கப்படாது / Not digested by most bacteria
- போசணை அதிகம் / Very nutritious
- நிறமுடையது / Coloured
- வாயுவை வெளியிடும் / Releases gas
பதில் / Answer
(2) பெரும்பாலான பற்றீரியாவால் சிதைக்கப்படாது / Not digested by most bacteria — பெரும்பாலான பற்றீரியா ஏகாரைச் சிதைக்காது; குளிர்ந்ததும் திண்மமாகும்.
27. திண்ம வளர்ப்படகம் வழமையாக எதில் வைக்கப்படுகிறது? / Solid medium is usually held in?
- அமுக்க அடுப்பு / Autoclave
- பெற்றிக் கிண்ணம் அல்லது சோதனைக் குழாய் / Petri dish or test tube
- மென்சவ்வு வடிதாள் / Membrane filter
- பன்சன் சுடர் / Bunsen flame
- UV அறை / UV chamber
பதில் / Answer
(2) பெற்றிக் கிண்ணம் அல்லது சோதனைக் குழாய் / Petri dish or test tube — பெற்றிக் கிண்ணம் (Petri dish) அல்லது சோதனைக் குழாய்.
28. குறிப்பிட்ட நுண்ணங்கிகளை மட்டும் வளர அனுமதிக்கும் ஊடகம்? / Medium allowing only specific microbes?
- பொது ஊடகம் / General medium
- தேர்வு / விசேடித்த ஊடகம் / Selective / special medium
- திரவ ஊடகம் / Broth
- உலர் ஊடகம் / Dry medium
- -
பதில் / Answer
(2) தேர்வு / விசேடித்த ஊடகம் / Selective / special medium — தேர்வு (selective) / விசேடித்த ஊடகம்.
29. தூய்மை முறையின் (aseptic technique) நோக்கம்? / Purpose of aseptic technique?
- நுண்ணங்கிகளைச் சாயமிடல் / To stain microbes
- மாசடைதலைத் தவிர்த்தல் / To prevent contamination
- pH ஐ உயர்த்தல் / To raise pH
- ஏகாரை உருக்குதல் / To melt agar
- வளர்ச்சியை நிறுத்துதல் / To stop growth
பதில் / Answer
(2) மாசடைதலைத் தவிர்த்தல் / To prevent contamination — வெளிப்புற நுண்ணங்கிகள் புகாமல் மாசடைதலைத் தடுக்கிறது.
30. நிறமற்ற நுண்ணங்கிகளை அவதானிக்க உதவும் முறை? / Method to observe colourless microbes?
- வடிகட்டல் / Filtration
- சாயமிடல் (staining) / Staining
- அமுக்க அடுப்பு / Autoclaving
- கொதிப்பித்தல் / Boiling
- -
பதில் / Answer
(2) சாயமிடல் (staining) / Staining — மெத்திலீன் நீலம், படிக ஊதா, சப்ரனின் போன்ற சாயங்களால் சாயமிடல்.
31. சாயமிடுவதற்கு முன் நுண்ணங்கிகளுக்குச் செய்யப்படுவது? / Before staining, microbes must be?
- கொதிக்கவைக்கப்பட / Boiled
- கண்ணாடித் தகட்டில் நிலைப்படுத்தப்பட (fixed) / Fixed to the slide
- உலர்த்தப்பட மட்டும் / Only dried
- UV இல் வைக்கப்பட / Placed in UV
- -
பதில் / Answer
(2) கண்ணாடித் தகட்டில் நிலைப்படுத்தப்பட (fixed) / Fixed to the slide — சாயமிடும் முன் கண்ணாடித் தகட்டில் நிலைப்படுத்த (fix) வேண்டும்.
32. கீழ்க்காண்பவற்றுள் ஈரவெப்ப கிருமியழித்தலுக்கு உதாரணம்? / Which is an example of moist-heat sterilization?
- நேரடிச் சுடரிடல் / Direct flaming
- அமுக்க அடுப்பு / Autoclaving
- UV கதிர்வீசல் / UV radiation
- உலர்வளி அடுப்பு / Hot-air oven
- மென்சவ்வு வடிகட்டல் / Membrane filtration
பதில் / Answer
(2) அமுக்க அடுப்பு / Autoclaving — அமுக்க அடுப்பு (autoclave) — நீராவி ஈரவெப்பம்.
(10 புள்ளிகள் / marks)
கட்டமைப்பு வினா / Structured question
- கிருமியழித்தல் (sterilization) என்பதை வரையறுத்து, அமுக்க அடுப்பின் (autoclave) நிபந்தனைகளைக் கூறுக. / Define sterilization and state the conditions of an autoclave. (3)
- வெப்பத்திற்கு உணர்வான திரவங்களை எவ்வாறு கிருமியழிப்பர்? துளை அளவைக் கூறுக. / How are heat-sensitive liquids sterilised? State the pore size. (2)
- போசணை ஏகார் (NA) இன் கூறுகளையும், ஏகாரின் பங்கையும் கூறுக. / Give the composition of NA and the role of agar. (3)
- தூய்மை முறையின் (aseptic technique) நோக்கம் ஒன்றைக் கூறுக. / State one purpose of aseptic technique. (2)
மாதிரி விடை / Model answer
(அ) கிருமியழித்தல் — உள்வித்துக்கள் உட்பட எல்லா நுண்ணங்கி வடிவங்களையும் அழித்தல்; அமுக்க அடுப்பு — 121 °C நீராவி, 1 atm (15 psi), 15 நிமிடம். (3)
(ஆ) மென்சவ்வு வடிதாள் (membrane filter) மூலம் வடிகட்டல்; துளை அளவு 0.01–0.45 µm. (2)
(இ) NA — பெப்டோன், இறைச்சிச்சாறு, NaCl, ஏகார், காய்ச்சி வடித்த நீர்; ஏகார் — திண்மமாக்கும் கருவி (40 °C இற்குக் கீழ் திண்மமாகும், பற்றீரியாவால் சிதைக்கப்படாது). (3)
(ஈ) மாசடைதலைத் (contamination) தவிர்த்து தேவையான நுண்ணங்கியை மட்டும் தூயதாக வளர்க்க. (2)
(ஆ) மென்சவ்வு வடிதாள் (membrane filter) மூலம் வடிகட்டல்; துளை அளவு 0.01–0.45 µm. (2)
(இ) NA — பெப்டோன், இறைச்சிச்சாறு, NaCl, ஏகார், காய்ச்சி வடித்த நீர்; ஏகார் — திண்மமாக்கும் கருவி (40 °C இற்குக் கீழ் திண்மமாகும், பற்றீரியாவால் சிதைக்கப்படாது). (3)
(ஈ) மாசடைதலைத் (contamination) தவிர்த்து தேவையான நுண்ணங்கியை மட்டும் தூயதாக வளர்க்க. (2)
(கட்டுரை / essay)
கட்டுரை வினா / Essay question
நுண்ணங்கிகளை வளர்ப்பதற்குப் பயன்படும் கிருமியழித்தல் முறைகளையும் வளர்ப்படகம் தயாரித்தலையும் விபரிக்க. / Describe the methods of sterilization and the preparation of culture media used in culturing microorganisms.
விடைக் குறிப்புகள் / Answer outline
• கிருமியழித்தல் வரையறை — எல்லா வடிவம் + உள்வித்து அழித்தல்.
• பௌதிக முறைகள் — ஈரவெப்பம் (அமுக்க அடுப்பு 121 °C/15 நி), உலர்வெப்பம் (சுடரிடல், எரித்தல், உலர்வளி 170 °C/2 மணி), பாய்ச்சராக்கம் (HTST/LTLT/UHT), கொதிப்பித்தல், வடிகட்டல் (0.01–0.45 µm), UV.
• இரசாயன முறைகள் — எத்திலீன் ஒட்சைட்டு, குளோரின் இருஒட்சைட்டு.
• வளர்ப்படக நிபந்தனை — போசணை, ஈரலிப்பு, pH, கிருமியழிக்கப்பட்ட நிலை.
• NA (பற்றீரியா), PDA (பூஞ்சை); ஏகார் = திண்மமாக்கும் கருவி; பெற்றிக் கிண்ணம்.
• தூய்மை முறை — மாசடைதல் தவிர்ப்பு; சாயமிடல், நிலைப்படுத்தல்.
• பௌதிக முறைகள் — ஈரவெப்பம் (அமுக்க அடுப்பு 121 °C/15 நி), உலர்வெப்பம் (சுடரிடல், எரித்தல், உலர்வளி 170 °C/2 மணி), பாய்ச்சராக்கம் (HTST/LTLT/UHT), கொதிப்பித்தல், வடிகட்டல் (0.01–0.45 µm), UV.
• இரசாயன முறைகள் — எத்திலீன் ஒட்சைட்டு, குளோரின் இருஒட்சைட்டு.
• வளர்ப்படக நிபந்தனை — போசணை, ஈரலிப்பு, pH, கிருமியழிக்கப்பட்ட நிலை.
• NA (பற்றீரியா), PDA (பூஞ்சை); ஏகார் = திண்மமாக்கும் கருவி; பெற்றிக் கிண்ணம்.
• தூய்மை முறை — மாசடைதல் தவிர்ப்பு; சாயமிடல், நிலைப்படுத்தல்.
விரைவு சரிபார்ப்பு / Quick recall
Q. ஏகார் ஏன் திண்மமாக்கும் கருவியாகச் சிறந்தது, அது எந்த வெப்பநிலைக்குக் கீழ் திண்மமாகிறது? / Why is agar a good solidifying agent and below what temperature does it set?
பதில் / Show answer
பெரும்பாலான பற்றீரியாவால் சிதைக்கப்படாது; 40 °C இற்குக் கீழ் திண்மமாகிறது. / Not digested by most bacteria; solidifies below 40 °C.
⏱ விரைவு மீட்டல் — 60 வினாடி
இந்த உட்பகுதியின் கட்டாயப் புள்ளிகள்
- ஊடகம்: ஊட்ட அகார் (திட/திரவ).
- தூய்மை முறை (aseptic) — மாசுபடாமல் வளர்த்தல்.
- கருத்தடைப்பு (autoclave) — அனைத்து நுண்ணங்கியையும் அழித்தல்.
🎯 தேர்வு எடை ★★☆☆☆
✅ விரைவுச் சோதனை — 3 வினா